为什么要在黑暗中培养愈伤组织

一、愈伤组织的概念

通常是指植物受到机械、动物或微生物等伤害后，创伤部位细胞脱分化而不断增殖形成的松散排列、无特定结构和功能的非器官化组织。

二、愈伤组织的诱导

1. 材料的制备

用于愈伤组织培养的材料来源比较广泛，主要包括：

植物的分生组织、形成层组织：胡萝卜、甜菜等植物的肉质根

叶片组织：双子叶植物的幼嫩叶片、单子叶植物的叶鞘、叶片组织

单子叶植物的节间组织、鳞茎、块茎组织：大蒜、马铃薯

双子叶植物的某些幼嫩组织或薄壁组织：下胚轴、上胚轴、子叶、幼嫩茎切段、髓组织

植物的某些幼嫩器官组织：花药、幼穗、幼胚、子房、胚乳、花序、幼嫩的花托花梗等。

2. 培养基

一般选择盐浓度较高的培养基如MS、B5及它们的改良培养基来进行愈伤组织诱导效果较好。

培养基中还原态氮含量高，有利于愈伤组织的诱导。当愈伤组织生长过快，不分化时，用含细胞分裂素和高NO3-/NH4+比率的培养基培养可使其生长受抑制，而促进分化。

生长素是最早用于愈伤组织诱导和培养的植物激素，它适应于大多数植物的愈伤组织诱导。用IAA诱导愈伤组织，一般为1-10mg/L。NAA作用比较稳定，一般使用浓度为0.1-2.0mg/L。2,4-D是更有效的生长素类物质，其作用比NAA更强，一般使用浓度为0.1-2.0mg/L。

3. 诱导培养

外植体接入诱导培养基后，置于25-28℃条件下培养。愈伤组织诱导培养不需要光照条件，在黑暗或散光条件下最好。